La cromatografia di affinità al boronato è ampiamente utilizzata e il metodo è stato recentemente migliorato e progettato per le misurazioni di emoglobina glicata. La glicosilazione totale dell’emoglobina e il contributo della glicosilazione all’N-terminale delle catene beta e nelle posizioni “non” beta-N-terminali sono stati quantificati mediante l’uso dell’affinità del boronato e della cromatografia a scambio ionico.
È stato riscontrato che la glicoemoglobina (y) correla linearmente (y = 1,92x + 0,53; r = 0,96) con Emoglobina Glicosilata (x) e contiene circa il 50% di emoglobina glicosilata beta-N-terminale. Questo risultato è in accordo con il legame su agarosio boronato dei vari componenti dell’emoglobina risolti mediante cromatografia a scambio cationico. Una quantità di glicoemoglobina simile a quella di Emoglobina Glicosilata era isolabile da HbA.
Una pendenza inferiore a 2 risulta perché l’Emoglobina Glicosilatac è trattenuto solo fino al 93% e l’intercetta della linea di regressione riflette l’aderenza parziale (65%) dell’Emoglobina Glicosilata+b alla resina. Questi risultati confermano il verificarsi di una significativa glicosilazione “non”-beta-N-terminale e mostrano che in condizioni cromatografiche ottimali la glicoemoglobina totale può essere determinata con la cromatografia di affinità al boronato.
Rispetto alle metodiche precedenti, questo metodo è dotato di una maggiore specificità per la Emoglobina Glicosilata , anche se la presenza di una significativa intercetta in tutte le correlazioni effettuate con il metodo di riferimento IFCC testimonia una loro diversità in termini di quantità misurata.
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Gli studi mostrano che solo una coppia di gruppi idrossilici, quelli a carbonio C2 e C3, è nella configurazione cis complanare che è necessario per un allenamento complesso. Nella forma aldimina di glicoemoglobina questa disposizione cis favorevole non è stabilizzata. Invece, nella forma a catena aperta, tutti i gruppi ossidrilici adiacenti possono assumere una configurazione cis-reattiva risultante in un’affinità comparabile di glicoemoglobina labile per l’affinità supporto finito
Il grado di glicosilzione al beta-N-terminale e in tutti gli altri siti è simile, e che la concentrazione totale di glicoemoglobina determina estratto dalla cromatografia di affinità del boronato è accurato rappresentato dal legame dell’emoglobina purificata componenti. La concentrazione totale di glicoemoglobina di gli emolisati possono quindi essere accuratamente e specificamente determinato con questa metodologia. Questa metodologia e l’esperienza con A semplice impostazione della portata lineare bassa per la quantificazione di routine della glicosilazione dell’emoglobina nei campioni clinici è stata descritta in diverse pubblicazioni.
L’American Diabetes Association” (ADA) raccomanda la determinazione della HbA 1c in tutti i soggetti con diabete mellito in terapia al fine di monitorare il controllo glicometabolico a medio-lungo termine per valutare e, nel caso, ridurre il rischio di complicazioni causate da alterazioni del microcircolo .